1. 과업개요

가. 추진배경 및 필요성

ㅇ 넙치의 근육에 기생하는 쿠도아는 한국과 일본에서 발생하고 있으며, 식중독을 유발하는 원인 중 하나로 추정되므로 쿠도아충(이하 쿠도아) 구제제 개발을 통한 관리대책 마련

ㅇ 쿠도아충 구제 후보물질을 사용하여 넙치 쿠도아충에 대한 구제효과 정량화 분석 및 혈액학적·병리조직학적 분석을 통한 유효성 조사

나. 과업범위 및 내용

◦ 과업기간 : 계약일로부터 2022년 12월 9일까지

◦ 예산액 : 150,000,000원

ㅇ 쿠도아 구제 후보물질의 유효농도 분석

ㅇ 쿠도아 구제 후보물질의 유효성 조사

․ 쿠도아 감염 넙치를 대상으로 후보물질을 실험동물에 월2회(15일 간격)로하여 4개월간 주사하며 쿠도아 감염변화를 분석한다.

* 쿠도아 구제 후보물질 : 톨트라주릴 유도체, 암프롤리움

․ 구제 후보물질의 구제효과를 정량 분석으로 실시하고 병리조직 검사를 실시한다.

2. 과업추진 방안

가. 추진목표

ㅇ 쿠도아 구제 후보물질의 유효농도 분석

ㅇ 쿠도아 구제 후보물질의 구제효과 및 유효성 조사

나. 추진전략

ㅇ 쿠도아를 대상으로 구제 후보물질의 살충 유효농도를 설정한다.

ㅇ 쿠도아충 구제 후보물질의 유효성 조사

다. 주요 과업내용

ㅇ 후보물질의 유효농도 분석

- 후보물질 : 톨트라주릴 유도체(PK08), 암프롤리움

- 대상기생충 : Kudoa septempunctata

- 시기/개소 : 수시

- 조사방법 : 유전자 정량분석 및 현미경 검경

* 분리한 쿠도아에 구제후보 물질 처리 후 쿠도아 사멸 유효 농도를 산정하여야 함

** 쿠도아 사멸확인은 발주기관 시험방법을 따르거나, 타 방법을 적용할 경우 반드시 발주기관과 합의하여 수행해야 함

ㅇ 후보물질 유효성 조사

- 시험동물 : 쿠도아(포자 105/g 이상) 감염넙치 100마리 이상

- 후보물질 : 톨트라주릴 유도체(PK08), 암프롤리움

- 시험방법 : 후보물질을 4개월 동안 시험동물*에 근육주사(총 8회, 월2회/15일 간격)하며, 월별 감염변화 분석

* 시험동물은 반드시 개체 인식표지(RFID칩 삽입)한 후 감염변화 분석하며, 대조군을 두어야 함

- 조사방법 : 현미경 검경, 유전자 분석(RT-PCR) 및 병리조직분석

· 후보물질을 주사한 시험동물의 쿠도아 감염변화 분석을 위해 후보물질 투여 후 매월 구간별 5마리를 쿠도아 감염변화 분석에 사용함

· 후보물질의 쿠도아 감염변화 정량 분석(포자 : 사멸염색법, 유전자 : Real time-PCR)

· 매 시료채취 시 병리조직 분석실시(시료수(3마리) : 5마리 중 3마리)

· 시험 종료 시 남은 시험동물 전체를 대상으로 쿠도아 감염변화 분석 실시

- 시험결과 정리 및 분석

‧ 모든 시험결과치는 엑셀파일로 정리하며, 최종결과 분석은 정량 및 통계처리 함(최종보고서 제출 시 모든 시험결과치를 제출하여야 함)