본 발명은 아데노바이러스의 자기증식에 관여하는 E1B 영역의 유전자 중 종양억제 유전자 p53 단백질과 결합하는 55kDa 단백질을 코딩하는 유전자만을 선택적으로 제거시켜, 종양세포에서만 특이적으로 증식 가능하게 하고, 이를 통해 종양을 살상시킬 수 있도록 작제한 돌연변이형 재조합 아데노바이러스와 전기 바이러스를 이용하여 종양세포를 제거하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 종양특이적 살상능을 가진 재조합 아데노바이러스를 이용하여 종양세포를 제거하는 방법은 아데노바이러스의 유전자 중 E1B 영역의 55kDa 유전자를 제거시켜 재조합 아데노바이러스를 작제한 다음, 이를 증식시키고, 순수분리하는 단계; 전기 분리된 재조합 아데노바이러스를 종양세포에 감염시키는 단계; 및, 전기 재조합 아데노바이러스가 감염된 종양세포를 배양하는 단계를 포함한다. 이러한 종양특이적 살상능을 지닌 재조합 아데노바이러스의 응용은 증식불능 아데노 바이러스에 치료용 유전자를 도입하여 바이러스가 도입된 세포에서만 국소적으로 치료효과를 보이는 종래의 유전자 치료의 한계를 극복할 수 있을 뿐만 아니라, 방사선 치료, 약물치료 및 치료유전자의 바이러스내 도입과 같은 기존의 암 치료법과의 병행요법을 통하여 치료효과를 극대화하고, 각각의 단점을 보완 극복할 수 있는 새로운 암 치료법의 개발에 활용될 수 있을 것이다.